首页>中国误诊学杂志
  • 杂志名称:中国误诊学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华预防医学会 漯河市中心医院 重庆第九人民医院
  • 国际刊号:1009-6647
  • 国内刊号:11-4518/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:2001-2002年度中华预防医学会系列杂志优秀编辑质量奖期刊收录:CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中)
中国误诊学杂志2006年第23期

P-糖蛋白的免疫斑点定量分析

闫光志;所剑;刘力华

关键词:P-糖蛋白/免疫学, 抗体/分析, 免疫印迹法
摘要:目的:建立改良的斑点酶联免疫吸附分析,用于膜表达抗原P-gp的血清学鉴定.方法:常规筛选mdr-1稳定表达的K562细胞系;免疫组化和阿霉素抗性鉴定.细胞固相化于圆形硝纤膜纸片,BSA和H2O2封闭.纸片置入ELISA测量井;按照ABC-ELISA程序测定mdr-1基因疫苗免疫小鼠血清抗P-gp的滴度.结果:免疫组化显示稳定表达mdr-1的K562细胞系膜P-gp阳性率近100%,阿霉素IC50较之对照细胞提高100%.斑点酶联免疫吸附分析中,全部对照血清OD450<0.1(1:2 000);而mdr-1基因疫苗免疫的血清(1:2 000)OD450均>0.496;平行样的变异系数微小.结论:改良的免疫斑点方法可作为测量细胞表达抗原之快速、敏感的测量方法,用于特异性抗体的大样本筛选.