AgNOR和染色体检查对胸腔积液的诊断价值

摘要：胸腔积液脱落细胞学检查是早期明确诊断恶性胸腔积液的重要手段，50%以上的恶性胸腔积液可经此而确诊，但这种建立在形态学基础上的研究，往往因胸水中肿瘤细胞过少、组织变异及形态上的不典型增生受到限制，若配合细胞核内核仁结构及染色体的检查，可使诊断的特异性和敏感性有所提高。1　核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)　　细胞的核糖体是由核仁合成和组装的，核糖体基因rDNA盘聚在近端着丝点染色体(13、14、15、21与22号染色体)短臂的次缢痕区域，构成核仁组成区(NOR)。在核酸到蛋白质的转移过程中，NOR是一个重要的结构；细胞中的NOR合成的数量取决于核仁的数量。NOR数目能反映rRNA合成的水平，而银既不与rDNA结合，也不与rRNA结合，而与NOR相关蛋白(NORAPS)结合，形成核仁组成区相关的嗜银蛋白(AgNOR)，AgNOR数目、大小和形态的变化主要是由于NOR的变化所致，并非rDNA量的变化。AgNOR直接参与核糖体前RNA的转录、加工和装配［1］。AgNOR数目的多少与下列因素有关2］：①核仁内rDNA转录活动水平；②在染色体组中NOR染色体的数目；③所处细胞分裂周期中的阶段。　　AgNOR于1984年由国外学者Ploton研究证实，在细胞核有丝分裂过程中具有很高的分辨能力。1986年Ploton［3］应用于前列腺良、恶性疾病鉴别诊断方面，Crocker［4］应用于淋巴瘤及良、恶性黑色素细胞病变等，结果均显示肿瘤细胞的AgNOR明显增多。于1989年已广泛应用于肿瘤方面的研究，在国内进行许多肿瘤组织(如胃癌、结肠癌、乳腺癌和肝癌等)AgNOR的研究，但尚未成熟，鉴于AgNOR检测是一种简便、迅速、可重复的方法，对肿瘤的研究有一定的发展前景，于1993年由抗癌协会临床细胞学专业委员会讨论并制定了国内研究工作的标准化方案［5］，使AgNOR的检测在肿瘤研究方面得到了推广应用。　　AgNOR在胸腔积液细胞学中的应用研究甚少，而1994年由Huang［6］等发现恶性胸腔积液细胞AgNOR明显高于良性胸腔积液，且AgNOR点分布不规则，大小变异差别很大，若以恶性细胞的AgNOR≥8计算，则其敏感性96%，特异性97%。国内1998年江山平［7］等统计，AgNOR检测作为胸腔积液细胞学检查的一项指标，有助于良、恶性胸腔积液的鉴别诊断。恶性肿瘤细胞中AgNOR颗粒增多，Crocker［4］认为可能是：①细胞增殖活跃，以致许多细胞核内核仁分解，AgNOR分散于细胞核内；②核仁融合有缺陷，使AgNOR分散；③细胞染色体的倍数增加，导致含NOR染色体的数目增多；④rDNA转录活动增加，使本来不明显的AgNOR重现。